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长白猪λ-干扰素基因的原核表达与分析
引用本文:赵英杰,徐宏军,李尚波,王文成,卫广森,宣华.长白猪λ-干扰素基因的原核表达与分析[J].中国兽医科技,2006,36(1):46-51.
作者姓名:赵英杰  徐宏军  李尚波  王文成  卫广森  宣华
作者单位:[1]辽宁益康生物制品有限公司研发中心,辽宁辽阳111000 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046 [3]吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林长春130062
摘    要:以含长白猪IFN-λ基因的质粒载体为模板,用原核表达引物扩增了长白猪IFN-λ,基因,将其定向克隆至原核表达载体pET28b的EcoRI和XhoI位点,构建了长白猪IFN-λ基因的原核表达载体pET28b-PoIFN-λ。经酶切、PCR鉴定,表明所构建的重组质粒为特异性长白猪IFN-λ,基因原核表达质粒。将该重组质粒转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)细胞,阳性菌落筛选、SDS-PAGE分析以及Western-blotting分析表明,成功构建了表达重组猪IFN-λ的大肠埃希氏菌基因工程菌株。亚细胞定位分析表明,目的蛋白经原核表达后主要以不溶性包涵体形式存在,其他少量可溶性目的蛋白存在于细胞浆中。

关 键 词:长白猪  IFN-λ  原核表达  亚细胞定位  Western-blotting分析
文章编号:1673-4696(2006)01-0046-06
收稿时间:2005-08-05
修稿时间:2005-11-28
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