| 转人抑癌基因p53鸡的研究 |
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| 引用本文： | 李鹏姗,雷雪芹,徐廷生,等.转人抑癌基因p53鸡的研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2019,47(7):54-61. |
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| 作者姓名： | 李鹏姗 雷雪芹 徐廷生 等 |
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| 作者单位： | 河南科技大学动物科技学院;洛阳师范学院生命科学学院;河南科技学院动物科技学院;河南科技大学第一附属医院;全军肛肠外科研究所 |
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| 基金项目： | 河南省基础与前沿技术研究计划项目（072300430010）；洛阳市重点科技攻关计划项目（1101033A） |
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| 摘 要： | 【目的】探索MAR调控序列对外源人抑癌基因p53在转基因鸡体内整合稳定性的影响,为转基因禽类输卵管生物反应器的建立奠定基础。【方法】利用脂质体包埋法,将pEGFP-N1-p53/MAR重组真核表达载体转染人肝癌细胞(Hep3B),荧光显微镜和透射电镜检测转染含人野生型p53基因的Hep3B细胞形态及超微观结构的变化情况;显微注射法将脂质体介导的重组载体注入鸡X期胚盘的明区和暗区,制备G0代转基因鸡。以EGFP为报告基因,人工授精法制备G1代转基因鸡,对G0代和G1代鸡体外源基因p53进行PCR检测,并对G1代转基因鸡进行小动物活体成像检测。【结果】转染含人p53基因重组载体的Hep3B细胞明显皱缩变圆;微观结构层面,粗面内质网不明显,线粒体肿胀,细胞核中异染色质边集明显,并出现凋亡小体。G0代转基因鸡暗区组孵化率(45%)显著高于明区组孵化率(0)(P0.05),但均显著低于对照组孵化率(82.5%)(P0.05);获得4只基因组中含有外源p53基因的G0代转基因鸡,外源基因转染率为22.2%(4/18);获得2只G1代转基因鸡,转基因世代遗传率为3.08%(2/65)。【结论】重组真核表达载体pEGFP-N1-p53/MAR可以促进人肝癌细胞Hep3B的凋亡;脂质体介导的含MAR序列调控元件的pEGFP-N1-p53/MAR质粒,可以提高p53在转基因鸡基因组中的整合稳定性,并可遗传给后代。
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| 关 键 词： | 重组真核表达载体 Hep3B 转基因鸡 p53基因 转染率 世代遗传率 |
| 收稿时间： | 2018/5/6 0:00:00 |
Transfection of tumor suppressor gene p53 in chicken |
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| LI Pengshan,LEI Xueqin and XU Tingsheng,et al.Transfection of tumor suppressor gene p53 in chicken[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2019,47(7):54-61. |
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| Authors: | LI Pengshan LEI Xueqin and XU Tingsheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant eukaryotic expression vector Hep3B transgenic chicken p53 gene transfection rate heritability of generation |
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