| 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 王方昆,王一成,袁秀芳,徐丽华.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达[J].中国兽医学报,2007,27(5):657-660. |
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| 作者姓名： | 王方昆 王一成 袁秀芳 徐丽华 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018;浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,浙江,杭州,320021
2. 浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,浙江,杭州,320021 |
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| 摘 要： | 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆到原核表达载体pET-28a（＋）的多克隆位点,经鉴定后得到重组质粒pET-ApxⅣ,将此重组质粒转化到受体菌BL21-DL3中,并用诱导剂乳糖进行诱导表达,5 h后表达达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白约为61 000。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。
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| 关 键 词： | 猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1005-4545（2007）05-0657-04 |
| 修稿时间： | 2006-01-24 |
Cloning and expression of ApxⅣ of Actinobacillus pleuropneumoniae |
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| WANG Fang-kun,WANG Yi-cheng,YUAN Xiu-fang,XU Li-hua.Cloning and expression of ApxⅣ of Actinobacillus pleuropneumoniae[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(5):657-660. |
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| Authors: | WANG Fang-kun WANG Yi-cheng YUAN Xiu-fang XU Li-hua |
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| Institution: | 1. College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China;2. Institute of Animal Science and Veterinary Medicine, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 320021, China |
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