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转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究
引用本文:聂淑晶,武玉花,吴刚,肖玲,卢长明.转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究[J].中国油料作物学报,2008,30(3):265-271.
作者姓名:聂淑晶  武玉花  吴刚  肖玲  卢长明
作者单位:中国农业科学院油料作物研究所,武汉,430062
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),国家公益事业专项
摘    要:采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法。从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和463bp的旁侧基因组序列。根据已发表的RF1右边界旁侧序列的信息,发现外源T-DNA在向油菜基因组整合的过程中,在整合位点处有75bp的基因组序列丢失。根据分离的RF1左边界旁侧序列,建立了RF1事件特异性定性检测方法,扩增片断大小为284bp。利用建立起来的RF1事件特异性定性检测方法可以准确的将转基因油菜RF1与其它的转基因油菜品种区分开,检测灵敏度达到5个拷贝(0.013%)。该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因油菜品种RF1的身份识别提供了有效的方法。

关 键 词:GMO  事件特异性检测  定性PCR  RF1转化事件  左边界旁侧序列

Junction sequence of the transgenic rapeseed event RF1 and the methods of qualitative PCR detection
NIE Shu-jing,WU Yu-hua,WU Gang,XIAO Ling,LU Chang-ming.Junction sequence of the transgenic rapeseed event RF1 and the methods of qualitative PCR detection[J].Chinese Journal of Oil Crop Sciences,2008,30(3):265-271.
Authors:NIE Shu-jing  WU Yu-hua  WU Gang  XIAO Ling  LU Chang-ming
Abstract:
Keywords:GMO
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