山羊支原体肺炎亚种Hsp70基因克隆与序列分析 |
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引用本文: | 张建华,李媛,王景芹,王亮,乔祖建,辛九庆.山羊支原体肺炎亚种Hsp70基因克隆与序列分析[J].畜牧兽医科技信息,2007(9):29-30. |
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作者姓名: | 张建华 李媛 王景芹 王亮 乔祖建 辛九庆 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150000 2. 黑龙江省大兴安岭地区加格达奇区畜牧总站,大兴安岭,165000 3. 东北农业大学,哈尔滨,150000 |
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摘 要: | 山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(M.capricolum subsp.Capripneumoniae,Mccp)引起的高度接触性传染病,热休克蛋白Hsp70,在Mccp所有蛋白翻译后功能和结构的表达起作用。以Mccp中国分离株87001为模板,扩增了Hsp70的全序列,将该序列克隆到pMD18T载体上并测序。将序列与其它已知动物支原体的Hsp70序列进行分析比较。测序结果87001株Hsp70基因全长1773bp,编码591个aa,第631~633位TGA在支原体编码色氨酸而不是作为终止密码子。将该序列与多种致病支原体Hsp70基因进行分析比较,发现87001株Hsp70基因与山羊支原体山羊亚种(Mcc)、丝状支原体丝状亚种SC的DNA同源性为99.3%~99.4%,氨基酸同源性为99.2%~99.3%,而与非同种支原体猪肺炎支原体232株等Mhp菌株的DNA和氨基酸同源性仅为64.5%~74.4%和59.3%~77%。这表明DnaK基因在种内高度保守,种间差异较大。原核表达得到大小为41Kd的目的蛋白,经Westernblot证实,纯化蛋白可与Mhp阳性猪血清反应,具有免疫活性。
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关 键 词: | 猪肺炎支原体 猪喘气病 伴侣蛋白DnaK 热休克蛋白70 |
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