| 高粱DNA提取方法筛选及其在叶色性状基因定位中的应用 |
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| 引用本文： | 颜学慧,梁缘,沈梦茹,王佑栋,刘言龙,李杰勤,詹秋文.高粱DNA提取方法筛选及其在叶色性状基因定位中的应用[J].江苏农业科学,2023(12):50-56. |
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| 作者姓名： | 颜学慧 梁缘 沈梦茹 王佑栋 刘言龙 李杰勤 詹秋文 |
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| 作者单位： | 安徽科技学院农学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(编号：31971993)；;国家重点研发计划(编号：2018YFD0300902)；;安徽省教育厅高校科学研究项目(编号：KJ2020A0066)； |
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| 摘 要： | 获得高质量的DNA是分子试验的一个先决条件，常用的植物DNA提取过程及步骤繁杂，需要进行多次离心操作，所需时间较长，并且在DNA提取过程中会用到三氯甲烷和其他一些有毒试剂，对操作人员有一定危害。为了筛选出高粱DNA的最优提取方法，进行基因定位等方面的研究，采用十二烷基硫酸钠(SDS)法、SDS+2%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、CTAB+2%PVP法和磁珠法，提取高粱不同部位(嫩叶、老叶、根、茎、种子)的DNA,然后对其提取步骤、DNA浓度、吸光度、PCR扩增效果等进行比较。结果表明，磁珠法步骤简单、无毒、低成本，所需时间仅为其他几种方法的1/3,D260 nm/D280 nm为1.8～2.0,DNA的质量、纯度、浓度优于其他方法。各试验数据表明，磁珠法提取的DNA最适于分子生物学验，将其应用于高粱叶色性状基因的定位，可将紫色叶片基因PL1初步定位到4号染色体上，白条纹叶基因WSL10初步定位到10号染色体上。
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| 关 键 词： | 高粱 DNA 磁珠法 紫叶 白条纹叶 基因定位 |
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