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猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化
引用本文:裴仉福,陈瑞爱,唐秀英,朱文冠,唐满华,李琳,程含波,温纳相.猪白细胞介素-18基因表达及重组蛋白的纯化[J].中国兽药杂志,2007,41(2):5-9.
作者姓名:裴仉福  陈瑞爱  唐秀英  朱文冠  唐满华  李琳  程含波  温纳相
作者单位:1. 广东大华农动物保健品有限公司,广东新兴,527439
2. 广东温氏食品集团有限公司,广东新兴,527439
摘    要:以pcDNA3.1-IL18为模板进行PCR扩增获得猪白细胞介素-18(IL-18)的成熟肽基因,以KpnⅠ、SacⅠ双酶切PCR产物作为供体,KpnⅠ、SacⅠ双酶切的pET41c和pET32c作为载体,连接载体供体,转化DH5α,经双酶切、PCR鉴定及测序筛选出阳性重组质粒,并命名为pET41c-IL18和pET32c-IL18。将pET41c-IL18和pET32c-IL18转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。SDS-PAGE及W estern-blotting分析结果表明,所表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,pET32c-IL18重组蛋白分子质量约33 ku,与预期大小相符。将包涵体提取物用8 mol/L脲变性,经N i-NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。

关 键 词:猪白细胞介素-18  基因表达  蛋白纯化
文章编号:1002-1208(2007)02-0005-05
修稿时间:2006-12-01

The Expression of Porcine Interleukin-18 Gene and the Purification of Its Recombinant Protein
PEI Zhang-fu,CHEN Rui-ai,TANG Xiu-ying,ZHU Wen-guan,TANG Man-hua,LI Lin,CHENG Han-bo,WEN Na-xiang.The Expression of Porcine Interleukin-18 Gene and the Purification of Its Recombinant Protein[J].Chinese Journal of Veterinary Drug,2007,41(2):5-9.
Authors:PEI Zhang-fu  CHEN Rui-ai  TANG Xiu-ying  ZHU Wen-guan  TANG Man-hua  LI Lin  CHENG Han-bo  WEN Na-xiang
Abstract:
Keywords:porcine interleukin-18  gene expression  protein purification
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