| 小豆锈病分子检测体系的构建及应用 |
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| 引用本文： | 殷丽华,张金鹏,章国庆,刘国辉,柯希望,左豫虎.小豆锈病分子检测体系的构建及应用[J].干旱地区农业研究,2023(6):238-244. |
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| 作者姓名： | 殷丽华 张金鹏 章国庆 刘国辉 柯希望 左豫虎 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学/国家杂粮工程技术研究中心/黑龙江省作物-有害生物互作生物学及生态防控重点实验室，黑龙江 大庆 163319;黑龙江省农业科学院克山分院，黑龙江 齐齐哈尔 161005;黑龙江省农业环境与耕地保护站，黑龙江 哈尔滨 150030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（32102173）；黑龙江省自然科学基金项目（YQ2020C034） |
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| 摘 要： | 由豇豆单胞锈菌（Uromyces vignae Barclay）引起的小豆锈病是小豆生产中危害最为严重的病害之一，建立早期分子检测技术体系对病害早期诊断和及时防控具有重要意义。本研究以豇豆单胞锈菌ITS序列为依据设计引物，结合已报道的单胞锈菌属特异检测引物，以豇豆单胞锈菌为目标菌，以茄链格孢、茄丝核菌、禾谷镰刀菌、稻瘟菌、苹果轮纹病菌、半裸镰刀菌、玉米链格孢菌、尖孢镰刀菌和禾顶囊壳等9种常见植物病原真菌为参照菌，采用CTAB法提取上述各菌株的基因组DNA，应用普通PCR技术筛选出豇豆单胞锈菌的特异性检测引物UV-ITS，在此基础上设计巢式PCR引物UV-MX，构建了基于巢式PCR的高灵敏度小豆锈病分子检测体系。该巢式PCR体系在基因组DNA浓度仅为4×10-6 ng·μL-1时仍可实现有效扩增，其灵敏度是普通PCR的10万倍。以感病小豆品种‘宝清红’接种锈菌后不同时间的叶片为材料检验检测体系的应用效果发现，接种后12 h的小豆叶片样本即可扩增出豇豆单胞锈菌的特异性条带。本研究建立的小豆锈病分子检测体系特异性强、灵敏度高，具备对潜伏期病害进行早期诊断的应用潜力，可为小豆锈病的早期快速诊断和及时防控提供重要的技术支撑。
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| 关 键 词： | 小豆 锈病 豇豆单胞锈菌 分子检测 巢式PCR |
Construction and application of molecular detection system for adzuki bean rust |
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| YIN Lihu,ZHANG Jinpeng,ZHANG Guoqing,LIU Guohui,KE Xiwang,ZUO Yuhu.Construction and application of molecular detection system for adzuki bean rust[J].Agricultural Research in the Arid Areas,2023(6):238-244. |
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| Authors: | YIN Lihu ZHANG Jinpeng ZHANG Guoqing LIU Guohui KE Xiwang ZUO Yuhu |
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| Institution: | Heilongjiang Bayi Agricultural University / National Coarse Cereals Engineering Research Center/Heilongjiang Provincial Key Laboratory of Crop-Pest Interaction Biology and Ecological Control, Daqing, Heilongjiang 163319, China;Keshan Branch of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences, Qiqihar, Heilongjiang 161005, China;Heilongjiang Agricultural Environment and Cultivated Land Protection Station, Harbin, Heilongjiang 150030, China |
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| Abstract: | |
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