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拟穴青蟹PHGPx基因的克隆及其表达分析
引用本文:刘春云,傅明骏,张子平,邹志华,贾锡伟,王艺磊.拟穴青蟹PHGPx基因的克隆及其表达分析[J].水产学报,2015,39(2):161-173.
作者姓名:刘春云  傅明骏  张子平  邹志华  贾锡伟  王艺磊
作者单位:集美大学水产学院,中国水产科学研究院南海水产研究所,集美大学水产学院,集美大学水产学院,集美大学水产学院,集美大学水产学院
基金项目:国家自然科学基金(31072200,31472266);集美大学创新团队基金(2010A001)
摘    要:磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(Phospholipid hydroperoxide Glutathione Peroxidase, PHGPx)是GPx基因家族的重要一员,能特异地清除磷脂和胆固醇等氢过氧化物,在机体抗氧化、抗凋亡、抗炎症以及雄性性成熟等过程中发挥着重要的作用。本研究从实验室拟穴青蟹(Scylla Paramamosain)转录组数据库中筛选出该基因的EST序列,利用SMART-RACE 技术克隆得到该基因的全长cDNA。经Blast 比对后,其与丰年虾(Artemia franciscana)的PHGPx氨基酸序列一致性最高,达到69%。同时系统进化树分析表明,该基因与其他物种的PHGPx(GPx4)聚为一支,而与GPx1、GPx2等亚型距离较远,故命名该基因为Sp-PHGPx。实时定量PCR结果显示,Sp-PHGPx在成熟青蟹雌雄各组织中均有不同程度的表达,其中精巢的表达量最高;且在雌雄相同组织中,雌性性腺的表达量显著低于雄性;而在鳃和心脏中的表达量显著高于雄性。在性腺不同发育阶段,Sp-PHGPx在卵巢发育过程中的表达量差异不显著;而在精巢发育过程中,其表达量在精子细胞期(T2期)显著高于精母细胞期(T1期)和成熟精子期(T3期),同时也显著高于卵巢发育各时期的表达量。在LPS应激下,鳃和肝胰腺中Sp-PHGPx的表达量分别在6h和12h显著上调;H2O2应激下,鳃中的表达量在3 h显著升高,肝胰腺中的表达量在被检测的各时相中无显著差异。以上结果表明,Sp-PHGPx可能在免疫防御反应以及精巢的发育和成熟等过程中发挥着重要作用。

关 键 词:拟穴青蟹  PHGPx  性腺发育  LPS  H2O2  基因表达
收稿时间:9/4/2014 12:00:00 AM
修稿时间:2014/10/17 0:00:00

Molecular cloning and expression analysis of Sp-PHGPx in Scylla paramamosain
LIU Chunyun,FU Mingjun,ZHANG Ziping,ZOU Zhihu,JIA Xiwei and WANG Yilei.Molecular cloning and expression analysis of Sp-PHGPx in Scylla paramamosain[J].Journal of Fisheries of China,2015,39(2):161-173.
Authors:LIU Chunyun  FU Mingjun  ZHANG Ziping  ZOU Zhihu  JIA Xiwei and WANG Yilei
Institution:Key Laboratory of Healthy Mariculture for East China Sea,Ministry of Agriculture,South China Sea Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Key Laboratory of Healthy Mariculture for East China Sea,Ministry of Agriculture,Key Laboratory of Healthy Mariculture for East China Sea,Ministry of Agriculture,Key Laboratory of Healthy Mariculture for East China Sea,Ministry of Agriculture,Key Laboratory of Healthy Mariculture for East China Sea,Ministry of Agriculture;Fisheries College,Jimei University;China
Abstract:
Keywords:Scylla paramamosain  PHGPx  gonadal development  LPS  H2O2  gene expression
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