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PCR结合斑点杂交技术检测鹦鹉喙羽病病毒方法的建立及应用
引用本文:于晓慧,田似报,王 琳,崔治中,常 爽,赵 鹏,李 阳.PCR结合斑点杂交技术检测鹦鹉喙羽病病毒方法的建立及应用[J].中国动物检疫,2018,35(11):66-70.
作者姓名:于晓慧  田似报  王 琳  崔治中  常 爽  赵 鹏  李 阳
基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFC1201304)
摘    要:鹦鹉喙羽病(PBFD)是鹦鹉目前最常见的疾病,对鹦鹉养殖业危害极其严重。根据鹦鹉喙羽病毒(PBFDV)基因片段的克隆和序列分析,设计合成1对特异性引物,以CP基因为模板,经PCR扩增获得830 bp的核苷酸DNA,并用DIG标记DNA,制备用于检测PBFDV的特异性核酸探针。用该核酸探针对疑似感染PBFDV的鹦鹉病料进行斑点杂交检测,并对鉴定为阳性的PBFDV进行全基因组扩增和测序分析。结果显示,利用PCR结合斑点杂交技术检测PBFDV,特异性强、敏感度高,具有可重复性。鉴定为阳性的2株PBFDV全基因组序列之间同源性为100%,与已报道序列的同源性为81.5%~98.9%。本研究为我国开展PBFDV感染的分子流行病学调查和临床诊断提供了一种敏感、特异的检测方法。

关 键 词:鹦鹉喙羽病  核酸斑点杂交  全基因组  遗传进化

Establishment and Application of PCR Combined with Nucleic Acid Dot Blot for Detection of PBFDV
Yu Xiaohui,Tian Sibao,Wang Lin,Cui Zhizhong,Chang Shuang,Zhao Peng,Li Yang.Establishment and Application of PCR Combined with Nucleic Acid Dot Blot for Detection of PBFDV[J].China Journal Of Animal Quarantine,2018,35(11):66-70.
Authors:Yu Xiaohui  Tian Sibao  Wang Lin  Cui Zhizhong  Chang Shuang  Zhao Peng  Li Yang
Abstract:
Keywords:
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