lincRNA Cox2通过miR-129-5p/AMPK调控BCG感染的巨噬细胞糖酵解进程 |
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引用本文: | 徐蕾,于嘉霖,刘莉,邓光存,吴晓玲.lincRNA Cox2通过miR-129-5p/AMPK调控BCG感染的巨噬细胞糖酵解进程[J].中国农业科学,2024(8):1606-1619. |
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作者姓名: | 徐蕾 于嘉霖 刘莉 邓光存 吴晓玲 |
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作者单位: | 宁夏大学生命科学学院/西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(32060160,32160162);;宁夏自然科学基金重点项目(2023AAC02015); |
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摘 要: | 【目的】探究lincRNA Cox2对BCG(Bacillus Calmette-Guérin)感染的RAW264.7巨噬细胞糖酵解进程的调控作用,阐明Mtb与巨噬细胞之间的相互作用,为结核病的诊断和治疗提供新的靶点。【方法】利用小干扰RNA敲减lincRNA Cox2的表达,以及使用miR-129-5p mimics过表达载体,结合BCG感染,通过实时荧光定量PCR检测lincRNA Cox2、miR-129-5p和促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达量;乳酸含量检测试剂盒检测乳酸(LD)的分泌情况;平板涂布法检测巨噬细胞菌载量情况;双荧光素酶报告基因系统验证lincRNA Cox2与miR-129-5p以及miR-129-5p与AMPK的互作关系;蛋白免疫印迹检测AMPK(AMP依赖蛋白激酶)及糖酵解途径中关键基因HK1(己糖激酶1)、PKM2(丙酮酸激酶2)和LDHA(乳酸脱氢酶)的表达变化。【结果】BCG感染12 h能够极显著上调RAW264.7巨噬细胞中lincRNA Cox2的表达(P=0.000013),与BCG组相比,siRNA+BCG组中AMPK(P=0.0...
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关 键 词: | lincRNA Cox2 miR-129-5p AMPK BCG 巨噬细胞 糖酵解进程 |
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