| 白菜小孢子超低温保存及复苏后胚状体诱导 |
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| 引用本文： | 谭舒心,张淑江,章时蕃,张慧,李国亮,刘希童,刘雨佳,孙日飞,李菲.白菜小孢子超低温保存及复苏后胚状体诱导[J].中国蔬菜,2022(7):52-61. |
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| 作者姓名： | 谭舒心 张淑江 章时蕃 张慧 李国亮 刘希童 刘雨佳 孙日飞 李菲 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
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| 基金项目： | 中国农业科学院科技创新工程项目(CAAS-ASTIP-IVFCAAS)；;国家大宗蔬菜产业技术体系项目(CARS-23-A14)； |
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| 摘 要： | 随着白菜游离小孢子培养技术的不断优化，通过诱导小孢子胚状体获得大量DH系在白菜育种等科研领域得到了广泛应用。但小孢子供体植株受生长季节、生长期等影响，无法长期持续获取高生活力白菜小孢子，成为目前阻碍白菜细胞工程相关研究顺利推进的重要问题之一。本试验利用超低温技术对10份白菜材料小孢子开展冻存复苏研究，结果表明：利用改良B5液体培养基作为冷冻保护剂，白菜小孢子生活力明显高于传统冷冻保护剂二甲基亚砜处理的白菜小孢子；小孢子-80 ℃(冰箱)和-196 ℃(液氮)冻存180 d后生活力仍保持在85%以上，且两个温度处理间差异不显著，实际应用中可选择-80 ℃冰箱冻存替代传统-196 ℃液氮冻存；利用0.5 mL冻存管保存的白菜小孢子最适复苏条件为37 ℃恒温水浴40 s，在-80 ℃冰箱冻存90 d后复苏的小孢子平均生活力达87.9%。复苏冻存30、60、90 d后易出胚材料的白菜小孢子诱导获得了胚状体及再生植株；复苏冻存180 d的白菜小孢子在高温热激诱导条件下仍可感应胁迫，表现为体积膨大，且具胚胎发生能力的小孢子能够进行细胞分裂。本试验为国内首次开展的白菜小孢子超低温冻存研究，建立了白菜...
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| 关 键 词： | 白菜小孢子 超低温冻存 冷冻保护剂 复苏 胚状体诱导 |
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