苎麻Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因的克隆和表达分析 |
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引用本文: | 周精华,邢虎成,揭雨成,钟英丽,朱守晶,蒋杰,王亮.苎麻Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)基因的克隆和表达分析[J].作物学报,2012,38(3):549-555. |
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作者姓名: | 周精华 邢虎成 揭雨成 钟英丽 朱守晶 蒋杰 王亮 |
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作者单位: | 1 湖南农业大学苎麻研究所,湖南长沙410128;2 湖南省种质资源创新与资源利用重点实验室,湖南长沙410128;3 湖南农业大学生物科学与技术学院,湖南长沙410128 |
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基金项目: | 湖南省科技计划重点项目(2010TP4004-1);湖南省教育厅重点项目(09A042);湖南省教育厅优秀人才项目(10B050);湖南农业大学人才引进科技资助项目(07YT03);省部共建国家重点实验室培育基地科学基金开放项目(10KFXW09)资助 |
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摘 要: | 以耐旱性较强的湘苎3号为材料,从苎麻转录组测序结果中获得了1个与P5CS基因高度相似的Unigene,该片段长1 448 bp,根据该序列设计5′RACE和3′RACE槽式PCR引物,利用RACE结合RT-PCR技术分别克隆得到590 bp的5′端和293 bp的3′端,拼接获得该基因全长cDNA序列。对该序列进行生物信息学分析表明,该基因全长为2 318 bp,其中开放读码框为2 154 bp,编码717个氨基酸,其编码蛋白质的等电点和分子量分别为6.57 kD和77.56 kD,与亚洲棉、麻风树、拟南芥和水稻的P5CS基因的核苷酸序列相似性分别为81%、81%、75%和72%,蛋白质序列的相似性分别为86%、85%、78%和77%,说明该基因与P5CS为同源,被命名为BnP5CS1。半定量RT-PCR分析表明,该基因在苎麻的茎尖中表达量最高,在根中其次, 且受干旱胁迫的诱导。P5CS基因是植物体内合成脯氨酸的关键酶基因,BnP5CS1基因的克隆将为苎麻的抗逆分子育种和进一步的功能分析鉴定基础。
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关 键 词: | 苎麻 P5CS 脯氨酸 干旱 表达分析 |
收稿时间: | 2011-06-25 |
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