| 牛乳过敏原β-乳球蛋白间接竞争ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 布冠好,郑喆,郑海,罗永康.牛乳过敏原β-乳球蛋白间接竞争ELISA检测方法的建立[J].中国农业大学学报,2008,13(6). |
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| 作者姓名： | 布冠好 郑喆 郑海 罗永康 |
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| 作者单位： | 中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家科技支撑项目 |
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| 摘 要： | 检测牛乳中的主要过敏原β-乳球蛋白,利用β-乳球蛋白纯品免疫新西兰白兔,制得兔抗牛β-乳球蛋白的多克隆抗体,以β-乳球蛋白包被抗原、自制抗体为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为二抗、四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了牛乳中β-乳球蛋白的间接竞争酶联免疫检测法(ELISA).确定了包被抗原质量浓度为0.5 μg/mL,一抗最佳稀释度为1∶6 400,酶标二抗稀释度为1∶10 000.结果达到批内误差3.87%,批间误差6.51%;检测的线性范围为0.05～1.00 μg/mL,标准曲线回归方程y=-1.930 2x-0.124 1,相关系数为0.994 5,说明所建立的方法灵敏度高,具有良好的准确性和重复性.
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| 关 键 词： | 牛乳 β-乳球蛋白 过敏原 多克隆抗体 间接竞争ELISA 检测 |
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