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| 牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备 | |
| 引用本文： | 盖仁华,王衡,郎跃深,李广兴,张瑞莉,马德星,张国庆,杨贵君.牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备[J].中国畜牧兽医,2011,38(12):71-75. |
| 作者姓名： | 盖仁华 王衡 郎跃深 李广兴 张瑞莉 马德星 张国庆 杨贵君 |
| 作者单位： | 1. 东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;浙江大学药物安全评价研究中心,浙江杭州 310058 2. 华南农业大学兽医学院,广东广州,510642 3. 河北秦皇岛青龙满族自治县职教中心,河北秦皇岛,066500 4. 东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030 |
| 基金项目： | 黑龙江省教育厅科学研究项目，黑龙江省自然科学基金重点项目 |
| 摘 要： | 根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+)-rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49 ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白。用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料。 |
| 关 键 词： | 白细胞介素-2 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2011-05-12 |
Prokaryotic Expression of Bovine Interleukin-2 Gene and its Polyclonal Antibody Preparation |
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| GAI Ren-hua , WANG Heng , LANG Yue-shen , LI Guang-xing , ZHANG Rui-li , MA De-xing , ZHANG Guo-qing , YANG Gui-jun.Prokaryotic Expression of Bovine Interleukin-2 Gene and its Polyclonal Antibody Preparation[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2011,38(12):71-75. | |
| Authors: | GAI Ren-hua WANG Heng LANG Yue-shen LI Guang-xing ZHANG Rui-li MA De-xing ZHANG Guo-qing YANG Gui-jun |
| Institution: | 1. College of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Harbin 150030,China;2. Center for Drug Safety Evaluation and Research of Zhejiang University, Hangzhou 310058,China;3. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642,China;4. Qinglong Manchu Autonomous County Vocational Education Center, Qinhuangdao of Hebei Province,Qinhuangdao 066500,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | interleukin-2 expression polyclonal antibody |
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