重组人表皮生长因子(hEGF)植物表达载体的构建(英文) |
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引用本文: | 武玉永,刘东东,信凯,姚庆收.重组人表皮生长因子(hEGF)植物表达载体的构建(英文)[J].农业科学与技术,2013(7):937-940,978. |
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作者姓名: | 武玉永 刘东东 信凯 姚庆收 |
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作者单位: | 滨州医学院药学院医学遗传学教研室;滨州医学院药学院基因工程教研室 |
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基金项目: | Supported by the Shangdong Natural Science Foundation(ZR2010HQ054);the Ministry of Agriculture Opening Project Fund of Key Laboratory of Rubber Biology/State Key Laboratory Breeding Base of Cultivation&Physiology for Tropical Crops(KLOF1106);the Special Fund for Backbone Teachers and Domestic Visiting Scholars of Shandong Higher Education Institutions9~~ |
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摘 要: | 目的]构建重组人表皮生长因子的植物用表达载体,为应用花生毛状根表达系统表达人表皮生长因子(hEGF)奠定基础。方法]在GenBank中找到hEGF基因序列,并人工合成;将含hEGF基因与绿色荧光蛋白(GFP)的基因连接,用加相应接头的引物扩增得到这2个基因的片段,然后用Sal I和EcoR I的进行双酶切并回收;提取质粒pRI 101 AN DNA,并用Sal I和EcoR I对其进行双酶切并回收,再次将经过双酶切的2个DNA片段连接,将连接产物转化大肠杆菌XL10-Gold,再提取得到的发荧光重组子质粒的DNA,用酶切图谱和PCR进行鉴定,将验证正确的重组子中的质粒DNA命名为pBZG101。结果]hEGF和GFP连接成功,并成功地将这2个基因连接的片段连接至质粒pRI 101 AN DNA上,得到了重组人表皮生长因子的植物用表达载体pBZG101。结论]该研究成功构建了重组人表皮生长因子的植物用表达载体pBZG101。
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关 键 词: | hEGF 植物表达载体 大肠杆菌 构建 |
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