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拟态弧菌外膜蛋白OmpU 基因的原核表达及其免疫保护性研究
引用本文:李小飞,李槿年,季晶晶,余为一.拟态弧菌外膜蛋白OmpU 基因的原核表达及其免疫保护性研究[J].中国水产科学,2008,15(2):307-312.
作者姓名:李小飞  李槿年  季晶晶  余为一
作者单位:安徽农业大学,动物科技学院,安徽合肥,230036
基金项目:国家自然科学基金 , 安徽省自然科学基金 , 安徽省教育厅自然科学基金
摘    要:自行构建的pMD18T-OmpU重组克隆质粒经BamHI/EcoRI双酶切后,定向插入原核表达质粒pGEX-4T-1中构建重组表达质粒pGEx-4T-1-OmpU.将重组表达质粒转化至大肠杆菌E.coli BL21进行IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳及Western-blot分析显示,以包涵体形式表达的GST-OmpU融合蛋白的分子量约为62.9 kD,可与鼠抗拟态弧菌外膜蛋白(Omps)免疫血清发生特异性反应,提示重组OmpU保留了天然Omps的抗原性.用纯化的融合蛋白免疫昆明系小鼠,以50LD50拟态弧菌(5×103CFU/mL)攻击,小鼠的免疫保护率为60%(9/15).表明OmpU是拟态.弧菌的保护性抗原之一,具有研发成为外膜蛋白基因工程亚单位苗的潜在价值.

关 键 词:拟态弧菌  OmpU基因  原核表达  免疫保护性  拟态弧菌  外膜蛋白  基因工程  原核表达  免疫保护性  研究  immunoprotection  Vibrio  gene  outer  membrane  protein  expression  价值  亚单位苗  抗原性  免疫保护率  昆明系小鼠  蛋白免疫  融合蛋白  纯化  重组
文章编号:1005-8737-(2008)02-0307-06
收稿时间:2007-07-13
修稿时间:2007-11-23

Prokaryotic expression of outer membrane protein U gene of Vibrio mimicus and its immunoprotection
LI Xiao-fei,LI Jin-nian,JI Jing-jing,YU Wei-yi.Prokaryotic expression of outer membrane protein U gene of Vibrio mimicus and its immunoprotection[J].Journal of Fishery Sciences of China,2008,15(2):307-312.
Authors:LI Xiao-fei  LI Jin-nian  JI Jing-jing  YU Wei-yi
Abstract:
Keywords:Vibrio mimicus  OmpU gene  prokaryotic expression  immunoprotection
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