| 猪肺炎支原体P36蛋白间接ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 祝永琴,冯志新,刘茂军,吴叙苏,邵国青.猪肺炎支原体P36蛋白间接ELISA检测方法的建立[J].江苏农业学报,2010,26(5). |
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| 作者姓名： | 祝永琴 冯志新 刘茂军 吴叙苏 邵国青 |
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| 基金项目： | 农业科技成果转化基金项目，公益性行业(农业)科研专项，江苏省农业科技自主创新基金项目 |
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| 摘 要： | 将已构建的含有猪肺炎支原体P36基因的酵母表达质粒pPICZα-A-P36在酵母菌X-33里进行表达,并对表达的蛋白进行Western-blotting鉴定。将其作为包被抗原包被酶标板,用羊抗猪IgG-HRP作为酶标二抗,并分别对抗原浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度以及作用时间等进行了优化,最终建立了稳定的抗猪肺炎支原体IgG的间接ELISA检测方法。应用该方法检测猪鼻支原体、猪絮状支原体、猪圆环病毒阳性血清等都是阴性,说明该方法具有良好的特异性。批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均小于8%,说明该方法具有良好的重复性。利用该方法检测猪肺炎支原体活疫苗(168株)免疫猪血清中IgG的动态变化,结果表明,免疫猪血清中的IgG在免疫后分泌逐渐增加,直至免疫后8周,而经强毒攻毒后抗体滴度明显增高。
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| 关 键 词： | 猪肺炎支原体 P36蛋白 IgG 间接ELISA |
Establishment of Indirect ELISA for Detection of Antibodies against Mycoplasma hyopneumoniae P36 Protein |
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| ZHU Yong-qin,FENG Zhi-xin,LIU Mao-jun,WU Xu-su,SHAO Guo-qing.Establishment of Indirect ELISA for Detection of Antibodies against Mycoplasma hyopneumoniae P36 Protein[J].Jiangsu Journal of Agricultural Sciences,2010,26(5). |
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| Authors: | ZHU Yong-qin FENG Zhi-xin LIU Mao-jun WU Xu-su SHAO Guo-qing |
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