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基于VIGS技术的烤烟烟碱调控及对烟碱含量的影响
引用本文:杨再军,张丽,张福强,张权,昝建朋,田举要,白茂军,徐世晓.基于VIGS技术的烤烟烟碱调控及对烟碱含量的影响[J].江苏农业科学,2024(6):61-67.
作者姓名:杨再军  张丽  张福强  张权  昝建朋  田举要  白茂军  徐世晓
作者单位:1. 河南农业大学烟草学院;2. 贵州省烟草公司安顺市公司
摘    要:在对烤烟原料要求烟碱含量低的中烟工业企业中,烟碱含量过高的烟叶难以在原料配方中适配,导致工业可用性较低。为了降低烟叶中烟碱的含量,通过病毒诱导基因沉默技术(virus induced gene silencing, VIGS)构建烟碱合成过程中4个关键基因(NtA622、NtPMT、NtBBL、NtMYB305a)的靶向沉默体系,探究瞬时沉默对基因相对表达量及烟碱含量的影响,并对不同载体的沉默效率与烟碱降低率进行贡献度分析。结果表明,通过目标序列靶片段成功构建了基于VIGS技术的沉默载体;T2处理沉默NtPMT基因后,最大沉默效率为55.23%,T3处理沉默NtBBL基因后,沉默效率为50.78%,两者差异不显著;各处理沉默相应基因后,不仅表现出对应基因表达量的下调,同时对本研究中其他基因的表达量也有影响;烟碱降低最多的是T3处理,降低率达到39.34%,同时T3处理沉默NtBBL基因的沉默效率对烟碱降低的贡献度最大,为0.775。本研究建立的VIGS技术体系有效沉默目的基因的表达,沉默NtBBL基因的T3处理沉默效率较高,烟碱含量较低,为调控烟碱含量提供了一种新思路与方法。

关 键 词:VIGS  烟碱  载体构建  相对基因表达量  病毒诱导的基因沉默
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