| 副结核分枝杆菌PanCD基因缺失株的构建及毒力评价 |
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| 引用本文： | 姜艳艳,鹿萍,崔宁,陈凡若,崔莹莹,党光辉,刘思国.副结核分枝杆菌PanCD基因缺失株的构建及毒力评价[J].黑龙江畜牧兽医,2024(7):36-42. |
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| 作者姓名： | 姜艳艳 鹿萍 崔宁 陈凡若 崔莹莹 党光辉 刘思国 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室 |
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| 摘 要： | 为了开发出能有效防控副结核病的减毒疫苗，试验采用同源重组的方法构建MAP K-10ΔPanCD基因缺失菌株，以MAP K-10菌株基因组为模板，扩增PanCD基因的上下游同源臂，构建pHAE159-p0004s-PanCD重组质粒，转化入耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Msg)感受态细胞中获得噬菌体，并感染MAP K-10菌株，然后挑取单克隆扩大培养，提取基因组进行PCR鉴定；绘制MAP K-10菌株与MAP K-10ΔPanCD基因缺失菌株的生长曲线；用MAP K-10ΔPanCD基因缺失菌株感染小鼠并评价其毒力，解剖取肝脏和脾脏，分析组织荷菌量和肝脏病理变化。结果表明：成功扩增出PanCD基因的上下游同源臂，经PCR扩增和酶切鉴定成功构建出pHAE159-p0004s-PanCD重组质粒，将重组质粒电转化入Msg感受态细胞中获得噬菌体，感染MAP K-10菌株后成功构建出MAP K-10ΔPanCD基因缺失菌株；与MAP K-10菌株相比，MAP K-10ΔPanCD基因缺失菌株的生长速率明显下降；攻菌2周时，MAP K-10ΔPanCD基因缺失菌株感...
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| 关 键 词： | 副结核分枝杆菌 PanCD基因 基因缺失株 毒力评价 减毒活疫苗 |
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