| 绵羊肺炎支原体贵州临床分离株GZ1 p109基因序列分析与原核表达 |
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| 引用本文： | 曾庆行,申艳娟,冉芳菲,杨鹏,成虹松,韦秒粘,李英,余潆,朱二鹏,程振涛.绵羊肺炎支原体贵州临床分离株GZ1 p109基因序列分析与原核表达[J].黑龙江畜牧兽医,2024(5):61-65. |
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| 作者姓名： | 曾庆行 申艳娟 冉芳菲 杨鹏 成虹松 韦秒粘 李英 余潆 朱二鹏 程振涛 |
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| 作者单位： | 1. 贵州大学动物科学学院;2. 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目“炎症小体信号通路介导Mo感染性炎症和细胞焦亡的分子机制研究”(32060786)；;贵州省科技计划项目“动物病原分子特征与致病机理研究”(黔科合平台人才[2021]5646)； |
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| 摘 要： | 为了探究绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)贵州临床分离株GZ1 p109基因生物信息及重组蛋白p109的免疫原性，试验采用PCR扩增Mo p109部分基因并克隆至T克隆载体pMD-19T中，经DNA测序后进行生物信息学分析；将双酶切后的p109基因片段与原核表达载体pColdⅠ连接，然后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中，用IPTG诱导重组蛋白表达，然后进行SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定。结果表明：扩增得到的Mo贵州临床分离株GZ1 p109部分基因片段大小为576 bp,编码蛋白的分子量为21.33 ku,由192个氨基酸组成；p109蛋白的二级结构主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲，第1～17,24～35,52～63,72～122,138～148,150～153,161～173,182～192位的氨基酸区段抗原指数相对较高；Mo贵州临床分离株GZ1与Mo 274株(登录号为CP079199)的亲缘关系很近；试验成功构建了pColdⅠ-p109原核表达重组质粒，表达的目的蛋白大小为27 ku,该重组蛋白p109能够...
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| 关 键 词： | 绵羊肺炎支原体 p109基因 原核表达 免疫原性 序列分析 生物信息学分析 |
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