| 基于生物反应器的猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)悬浮培养工艺研究 |
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| 引用本文： | 查银河,王芳,何玉龙,李肖梁,舒建洪.基于生物反应器的猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)悬浮培养工艺研究[J].黑龙江畜牧兽医,2024(7):11-17. |
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| 作者姓名： | 查银河 王芳 何玉龙 李肖梁 舒建洪 |
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| 作者单位： | 1. 杭州洪晟生物技术股份有限公司;2. 浙江大学 |
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| 摘 要： | 为了优化生物反应器全悬浮培养技术制备猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的工艺，试验首先通过摇瓶培养对病毒接种时的细胞密度、胰酶浓度、接毒剂量和收毒时间等培养条件进行优化；之后按照摇瓶培养确认的工艺进行生物反应器全悬浮培养工艺验证，同时对pH值、溶氧值(DO)、转速等培养参数进行优化，以病毒含量(TCID50)为指标，最终筛选出在15L生物反应器中培养猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)的最优条件，并进一步在50L生物反应器中进行工艺验证，将病毒液灭活后稀释至1×107.0 TCID50/mL免疫怀孕75～90d的健康易感初怀母猪，在分娩当日，采集母猪和仔猪血清，并对分娩的3日龄仔猪攻毒进行免疫原性试验。结果表明：猪流行性腹泻病毒(ZJ/15株)在摇瓶上的最适培养条件为当细胞密度达到6×106 个/mL以上时，用含胰酶(终浓度为20μg/mL)的无血清培养基将细胞密度稀释至2×106 个/mL,按感染复数(MOI)=0.1接毒，130 r/min摇床振荡培养36h可收获病毒液，病毒含量...
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 悬浮细胞培养 生物反应器 工艺放大 免疫原性 |
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