| DT40细胞sIgMλ轻链基因敲除载体的构建 |
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| 引用本文： | 游雷鸣,罗俊,王爱萍,张改平,卜丹,郭亚男,祈艳华.DT40细胞sIgMλ轻链基因敲除载体的构建[J].华北农学报,2009(3). |
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| 作者姓名： | 游雷鸣 罗俊 王爱萍 张改平 卜丹 郭亚男 祈艳华 |
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| 作者单位： | 河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室;郑州大学生物工程系; |
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| 基金项目： | “十一五”国家科技支撑计划(2006BAD06A04-6);;河南省基础与前沿技术研究计划(082300433201) |
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| 摘 要： | 从鸡B淋巴DT40细胞系中克隆-βactin启动子,替换pCDNA3.1(+)载体中的SV40启动子,构建-βactin启动子驱动的Neomycin抗性基因表达框。将克隆的sIgMλ轻链基因两侧各约2 kb的序列插入到抗性表达框的两侧作为同源臂。PCR、酶切以及测序结果表明成功构建了靶向sIgMλ轻链基因的置换型打靶载体pCDNA-act-neo-HR。为建立sIgMλ轻链基因敲除的DT40细胞模型,探究sIgMλ轻链在IBDV感染DT40细胞过程中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | sIgMλ轻链 -βactin启动子 基因敲除 同源重组 |
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