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| 禽传染性支气管炎病毒M基因在毕赤酵母中表达与蛋白反应活性检测 | |
| 引用本文： | 廖娟,王红宁,田浪,张毅.禽传染性支气管炎病毒M基因在毕赤酵母中表达与蛋白反应活性检测[J].中国兽医学报,2009,29(11). |
| 作者姓名： | 廖娟 王红宁 田浪 张毅 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学,动物医学院,四川,雅安,62501;四川省自贡市畜牧局,四川,自贡,643000 2. 四川大学,生命科学学院,动物疾病防控生物工程研究中心,四川,成都,610064 3. 四川农业大学,动物医学院,四川,雅安,62501 |
| 基金项目： | 国家"863"计划项目 |
| 摘 要： | 将禽传染性支气管炎病毒(IBV)M基因克隆到毕赤巴斯德表达载体pPIC9K中,构建了重组表达载体pPIC9K-M,电击转化毕赤巴斯德酵母GS115,经MD和MM平板筛选和PCR鉴定后,采用G418抗性梯度筛选得到高拷贝重组菌株GS115/pPIC9K-M His~+Mut~+,重组菌株用1%的甲醇诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析.结果表明,IBV M基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的相对分子质量约为33 000,能与IBV阳性血清特异性结合.将表达蛋白初步纯化后作为包被抗原,ELISA检测结果显示表达蛋白与特异性抗体反应良好,表明表达的M蛋白生物学活性良好.本研究表达的IBV M蛋白可作为制备IB诊断抗原的基础材料,对IB的防治有重要理论和实用价值. |
| 关 键 词： | 禽传染性支气管炎病毒 M基因 毕赤酵母 分泌表达 活性检测 |
Expression of avain infectious bronchitis virus M gene in Pichia pastoris and bio-activity assay |
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| Abstract: | |
| Keywords: | avian infectious bronchitis virus M gene Pachia pastoris secreted expression bioactivity assay |
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