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小鼠Foxc2质粒载体的构建及功能鉴定
引用本文:赵 霞,景旭斌,刘 静,赵涛涛,杨海丽,孙 超.小鼠Foxc2质粒载体的构建及功能鉴定[J].西北农业学报,2012,21(5):26-31.
作者姓名:赵 霞  景旭斌  刘 静  赵涛涛  杨海丽  孙 超
作者单位:西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100
摘    要:构建pcDNA3.1-Foxc2真核表达载体,并以脂质体转染3T3-L1前体脂肪细胞,探究Foxc2对脂代谢的影响。取孕后15d小鼠腹部脂肪组织提取总RNA,用PCR扩增Foxc2全长序列并连接至pMD18-T载体,测序正确后克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体,成功构建pcDNA3.1-Foxc2重组质粒载体。重组质粒转染3T3-L1前体脂肪细胞系,以未转染和空载体转染作为对照,通过RT-PCR和Western blotting法检测Foxc2核酸及蛋白表达,同时检测3T3-L1前体脂肪细胞中脂代谢相关基因FAS、ATGL、HSL及PPARγ的表达。结果显示,重组质粒转染组细胞中Foxc2的核酸和蛋白水平均显著高于对照组。同时发现超表达Foxc2显著降低FAS表达,显著升高HSL及PPARγ的表达,但是对ATGL的表达无显著影响,表明Foxc2具有抑制脂肪沉积的功能。

关 键 词:叉头框C2(Foxc2)  真核表达载体pcDNA3.1  细胞转染  脂肪沉积

Construction and Function Identification of Eukaryotic PlasmidCarrying Mouse Foxc2 Gene
ZHAO Xi,JING Xubin,LIU Jing,ZHAO Taotao,YANG Haili and SUN Chao.Construction and Function Identification of Eukaryotic PlasmidCarrying Mouse Foxc2 Gene[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2012,21(5):26-31.
Authors:ZHAO Xi  JING Xubin  LIU Jing  ZHAO Taotao  YANG Haili and SUN Chao
Institution:(College of Animal Science and Technology,Northwest A&F University,Yangling Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:Forkhead box ( Foxc2)  Eukaryotic expression plasmid pcDNA3  1  Cell transfection  Fat deposition
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