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Ⅰ群禽腺病毒100K蛋白主要抗原区基因片段的表达及鉴定
引用本文:罗思思,谢芝勋,刘加波,谢丽基,庞耀珊,邓显文,谢志勤,范 晴,彭 宜.Ⅰ群禽腺病毒100K蛋白主要抗原区基因片段的表达及鉴定[J].西北农业学报,2012,21(5):22-25.
作者姓名:罗思思  谢芝勋  刘加波  谢丽基  庞耀珊  邓显文  谢志勤  范 晴  彭 宜
作者单位:广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁530001
基金项目:广西特聘专家专项经费项目,新世纪百千万人才工程国家级人选专项经费项目,广西科技攻关项目,广西自然科学基金
摘    要:利用PCR技术对Ⅰ群禽腺病毒(FAVⅠ)100K蛋白主要抗原区片段进行扩增,得到约1062bp的基因片段;将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,经测序及序列分析确证其正确插入到表达载体,成功构建重组表达载体pGEX-100K。重组质粒转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,对表达的蛋白用SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果表明,100K蛋白主要抗原区基因片段得到良好的表达,表达的蛋白以可溶形式存在,分子质量约为64.5ku,与预测值相符;表达的100K蛋白与FAVⅠ阳性血清发生特异性结合,具有良好的反应原性,为FAVⅠ诊断试剂盒的研制奠定基础。

关 键 词:Ⅰ群禽腺病毒  100K  表达
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