| 不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白可溶性表达及免疫反应性比较 |
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| 引用本文： | 冯梦珂,王星博,林璐璐,崔明仙,颜焰,周继勇.不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白可溶性表达及免疫反应性比较[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2023(6):873-880. |
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| 作者姓名： | 冯梦珂 王星博 林璐璐 崔明仙 颜焰 周继勇 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学动物医学中心;2. 农业农村部动物病毒学重点实验室 |
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| 基金项目： | 浙江省重点研发计划项目（2020C02013）； |
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| 摘 要： | 本研究旨在系统性地探究不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的可溶性表达差别，并利用临床非洲猪瘟病毒抗体阳性血清比较包涵体和可溶性CD2v蛋白的免疫反应性。利用5种原核表达载体pCold-TF、pET28a、pMAL-C6T、p GEX-4T-1、p ET32a分别表达去除信号肽和跨膜区的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白，利用镍-氨三乙酸（nickel-nitrilotriacetic acid, Ni-NTA）亲和层析法分别纯化源自pET28a和pCold-TF表达载体的包涵体和可溶性CD2v蛋白，并用间接酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）方法比较纯化蛋白的免疫反应性。结果显示，p Cold-TF载体以表达可溶性蛋白为主，pMAL-C6T载体同时表达包涵体和可溶性蛋白，而其他载体主要表达包涵体蛋白。临床非洲猪瘟病毒抗体阳性血清检测数据显示，可溶性蛋白的免疫反应性显著优于包涵体蛋白（P<0.05）。p Cold-TF载体的触发因子（trigger factor, TF）标签可促进CD2v蛋白的可溶性表达，其表达蛋白的免...
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 CD2v蛋白 原核表达 可溶性表达 免疫反应性 |
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