| 烟草DXS基因的克隆及其亚细胞定位分析 |
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| 引用本文： | 李尊强,王春军,杨爱国,丁安明,冯全福,徐剑,焦惠鹏,高堃宇.烟草DXS基因的克隆及其亚细胞定位分析[J].安徽农业科学,2013(30). |
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| 作者姓名： | 李尊强 王春军 杨爱国 丁安明 冯全福 徐剑 焦惠鹏 高堃宇 |
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| 作者单位： | 牡丹江烟草科学研究所,黑龙江牡丹江,157011;中国农业科学院烟草研究所,烟草行业烟草基因资源利用重点实验室,山东青岛266101;哈尔滨烟叶公司肇东分公司,黑龙江肇东,151100 |
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| 基金项目： | 国家烟草专卖局科技重点项目“优质抗病烤烟新品种选育及育种技术研究”资助(110201002002) |
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| 摘 要： | 目的]从烟草cDNA中扩增出1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)基因(去除终止密码子TAA),并对其进行亚细胞定位分析。方法]利用RT-PCR技术分离、克隆DXS,将烟草DXS基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因重组构建亚细胞定位表达载体,转入根癌农杆菌LBA4404后注射侵染本氏烟烟草幼苗进行瞬时表达;并利用激光共聚焦扫描显微镜观察转GFP植株的表达情况。结果]显微镜观察发现,DXS和GFP融合蛋白仅在本氏烟叶肉细胞(尤其是保卫细胞)的叶绿体中产生绿色荧光,DXS基因在叶绿体中特异表达。结论]DXS定位在叶绿体中,为接下来对DXS基因功能研究提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS) 绿色荧光蛋白(GFP) 亚细胞定位 叶绿体 |
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