| 小麦TaSIM蛋白的原核表达与纯化及Western blotting检测 |
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| 引用本文： | 于月华,郑崇珂,倪志勇.小麦TaSIM蛋白的原核表达与纯化及Western blotting检测[J].分子植物育种,2021,19(2):494-497. |
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| 作者姓名： | 于月华 郑崇珂 倪志勇 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐, 830052;山东省农业科学院山东省水稻研究所,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31360264);自治区天山青年计划(2018Q018,2018Q002)共同资助。 |
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| 摘 要： | 为了获得TaSIM(Salinity-induced R2R3-MYB)基因的纯化蛋白,以便研究TaSIM转录因子的DNA结合特异性。本研究以含有pET28a-TaSIM原核表达载体的大肠杆菌BL21为材料,用0.5 mmol/L IPTG,在37℃诱导TaSIM融合蛋白表达2 h,收集上清液,采用Ni-NTA柱纯化含有His标签的TaSIM融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测结果表明获得了分子量大小约为33 kD的TaSIM融合蛋白。采用Western blotting检测TaSIM融合蛋白的表达,以鼠抗血清和辣根过氧化酶标记的山羊抗小鼠Ig G为抗体,结果表明TaSIM融合蛋白能够和抗体特异结合,说明诱导的蛋白是TaSIM融合蛋白。研究结果为进一步利用凝胶阻滞方法检验TaSIM蛋白与顺式作用元件的结合提供实验基础。
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| 关 键 词： | 小麦(Triticum aestivum) TaSIM 蛋白纯化 Western杂交 |
Prokaryotic Expression,Purification and Western blotting Detection of TaSIM Protein in Wheat |
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| Yu Yuehua,Zheng Chongke,Ni Zhiyong.Prokaryotic Expression,Purification and Western blotting Detection of TaSIM Protein in Wheat[J].Molecular Plant Breeding,2021,19(2):494-497. |
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| Authors: | Yu Yuehua Zheng Chongke Ni Zhiyong |
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| Institution: | (College of Agronomy,Xinjiang Agricultural University,Urumqi,830052;Shandong Rice Research Institute,Shandong Academy of Agricultural Sciences,Ji'nan,250100) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wheat(Triticum aestivum) TaSIM Protein purification Western blotting |
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