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牛iPSCs向神经细胞的诱导分化
引用本文:吕长荣,陈冬梅,辛晓玲.牛iPSCs向神经细胞的诱导分化[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2010,38(7):7-13.
作者姓名:吕长荣  陈冬梅  辛晓玲
作者单位:西北农林科技大学 动物医学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心;西北农林科技大学 动物医学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心;西北农林科技大学 动物医学院,陕西省农业分子生物学重点实验室,国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心;河南省农业科学院 畜牧兽医研究所
基金项目:国家自然科学基金项目(30671067);陕西省重大科技项目(2006KZ05-G1)
摘    要:【目的】通过类胚体介导体外自由分化与诱导分化,验证所建立的牛诱导性多能干细胞(Bovine induced pluripotent stem cells,biPSCs)能否分化为外胚层的神经细胞。【方法】将biPSCs悬浮培养以制备类胚体,通过类胚体介导使biPSCs在添加全反式维甲酸(RA)和β巯基乙醇(β-Me)诱导体系中分化为神经细胞,比较其诱导效率;提取不同诱导体系的分化细胞与类胚体的总RNA,利用RT-PCR方法鉴定分化细胞中神经细胞特异性基因的表达。【结果】培养的biPSCs集落呈球形,中央隆起,周围界限清晰,与胚胎干细胞集落形态类似。biPSCs碱性磷酸酶(AP)染色为阳性,并表达SSEA-4干细胞特异性表面蛋白。biPSCs通过类胚体介导分化,在未添加化学诱导物的条件下,可自由分化为Nestin、GFAP与NSE阳性神经细胞,其阳性细胞率分别为(15.14±1.13)%,(6.25±0.35)%和(5.45±0.62)%;biPSCs在RA诱导组中分化的神经细胞的数量最多,诱导后表达Nestin、GFAP和NSE细胞的阳性率分别为(49.56±2.33)%,(16.58±1.28)%和(13.66±2.21)%;在β-Me诱导组中,表达Nestin的阳性细胞率为(42.23±1.25)%。2个诱导组的诱导效率与无化学诱导物组有显著差异(P0.05)。RT-PCR检测结果显示,不同诱导体系获得的分化细胞均能扩增到神经细胞特异性基因Nestin和βⅢ-Tubulin片段,产物长度与预期结果完全一致。【结论】biPSCs在体外具有向神经细胞发育的能力;RA是诱导biPSCs向神经细胞分化的良好诱导物。

关 键 词:诱导性多能干细胞  神经细胞  诱导分化  发育多能性  
收稿时间:2010/3/19 0:00:00

Differentiation potential of neural lineage cells from bovine induced pluripotent stem cells
L Chang-rong,CHEN Dong-mei,XIN Xiao-ling,DOU Zhong-ying.Differentiation potential of neural lineage cells from bovine induced pluripotent stem cells[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2010,38(7):7-13.
Authors:L Chang-rong  CHEN Dong-mei  XIN Xiao-ling  DOU Zhong-ying
Institution:1(1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture,Shaanxi Branch of National Stem Cell Engineering&Technology Center,Yangling,Shaanxi 712100,China;2 Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,He’nan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou,He’nan,450002,China)
Abstract:
Keywords:
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