| 猪IL-18基因真核表达质粒的构建及其表达产物的生物学活性 |
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| 引用本文： | 邵攀峰,崔沛,郑兰兰.猪IL-18基因真核表达质粒的构建及其表达产物的生物学活性[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2009,37(12):85-90. |
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| 作者姓名： | 邵攀峰 崔沛 郑兰兰 |
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| 作者单位： | 河南农业大学 牧医工程学院;河南省动物疫病预防控制中心;河南农业大学 牧医工程学院 |
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| 基金项目： | 国家 “十一五”科技支撑计划专项（2006BAD06A08） |
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| 摘 要： | 【目的】构建猪IL-18的重组质粒,检测其表达产物的生物学活性,为进一步研究猪IL-18基因的结构与功能奠定基础。【方法】通过PCR技术从含猪IL-18全基因的克隆质粒中扩增猪IL-18基因,定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pIL-18,在脂质体作用下转染猪肾PK15细胞。【结果】重组质粒pIL-18经酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。通过RT-PCR检测,证实了猪IL-18在PK15细胞中的表达;SDS-PAGE分析结果表明,表达产物是与猪IL-18相符的约22 ku的蛋白条带;Western blot证实,表达产物能与猪IL-18单克隆抗体发生特异性反应。pIL-18对H1亚型猪流感灭活疫苗免疫增强作用的研究表明,pIL-18能够提高猪流感灭活疫苗诱发的细胞免疫应答。【结论】成功地构建了猪IL-18的重组质粒pIL-18,并在PK15细胞中获得了瞬时表达,且具有一定的免疫原性。
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| 关 键 词： | 猪白细胞介素18 真核表达 生物学活性 猪流感灭活疫苗 |
| 收稿时间： | 4/2/2009 12:00:00 AM |
Construction of eukaryotic expression plasmid of porcine IL-18 gene and identification of bioactivity of its expressed protein |
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| LIU Zeng wen,CHEN Kai,MI Cai hong,LI Qianb.Construction of eukaryotic expression plasmid of porcine IL-18 gene and identification of bioactivity of its expressed protein[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2009,37(12):85-90. |
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| Authors: | LIU Zeng wen CHEN Kai MI Cai hong LI Qianb |
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| Institution: | 1(1 College of Animal Husbandry and Veterinary,Henan Agricultural University,Zhengzhou,Henan 450002,China;2 Henan Province Center for Animal Diseases Control and Prevention,Zhengzhou,Henan 450008,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine interleukin-18 eukaryotic expression bioactivity swine influenza vaccine |
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