环介导等温扩增技术在禽病毒病检测中的应用 |
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引用本文: | 徐宁.环介导等温扩增技术在禽病毒病检测中的应用[J].养殖技术顾问,2014(3):242-242. |
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作者姓名: | 徐宁 |
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作者单位: | 辽宁省重大动物疫病应急中心, 沈阳 110161 |
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摘 要: | 环介导等温扩增技术(LAMP),是2000年由日本的荣研株式会的Notomi T等人开发出来的一种新的核酸扩增方法。LAMP法是针对靶基因的6个区域设计4种特异的引物,利用一种链置换脱氧核糖核酸聚合酶(DNA polymerase)在恒温条件保温几十分钟,即可完成核酸扩增反应,具有高特异性和等温快速扩增的特点,可以在1小时之内,将靶脱氧核糖核酸(DNA)片段扩增108~109倍。在DNA延伸合成时,从脱氧核酸三磷酸基质(dNTPS)中析出的焦磷酸离子与反应溶液中的镁离子结合,会产生一种焦磷酸镁的衍生物,而高效扩增的LAMP法生成大量这样的衍生物,并呈现白色沉淀。可以把浑浊度作为鉴定指标,仅凭肉眼观察白色混浊沉淀,就能鉴定扩增与否,而不需要繁琐的电泳和紫外观察等过程。且该方法不需要任何贵重的仪器和试剂,在水浴锅中即可完成反应,特别适合在野外现场和基层部门应用。迄今已建立了针对多种病原性细菌、真菌、病毒、寄生虫等的LAMP检测方法。下面就目前LAMP技术在禽病毒检测中的进展情况作一归纳。
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关 键 词: | 扩增技术 病毒检测 病毒病 等温 应用 介导 脱氧核糖核酸 LAMP法 |
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