| 兔视黄醇结合蛋白4基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 王泽祥,孙宏勇,郭东春,单丽玲,原冬伟,刘家森,曲连东.兔视黄醇结合蛋白4基因的克隆及原核表达[J].动物医学进展,2013(7):53-56. |
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| 作者姓名： | 王泽祥 孙宏勇 郭东春 单丽玲 原冬伟 刘家森 曲连东 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/实验动物研究室 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0302012008) |
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| 摘 要： | 为表达兔视黄醇结合蛋白4(rRBP4),提取兔肝脏组织总RNA,采用RT-PCR技术扩增了rRBP4的基因,大小为606bp。将其克隆于原核表达载体pET-32a(+)获得表达重组质粒,并转化大肠埃希菌BL21(DE3)Plyss中进行表达,pET-32a-rRBP4以包涵体形式表达,包涵体经过洗涤、变性后,用镍离子亲和层析柱纯化,并利用尿素梯度透析法复性。SDS-PAGE分析表明,获得与预期分子质量一致的特异性目的蛋白;Western blot检测表明,重组蛋白与小鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应。
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| 关 键 词： | 兔视黄醇结合蛋白4 原核表达 肝细胞 |
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