| 金柑磷酸蔗糖磷酸酶的基因克隆、表达与蛋白结构分析 |
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| 引用本文： | 龙凌云,黄秋岚,黄秋伟,檀小辉,李慧敏,刘功德,单彬,毛立彦.金柑磷酸蔗糖磷酸酶的基因克隆、表达与蛋白结构分析[J].核农学报,2023(12):2349-2360. |
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| 作者姓名： | 龙凌云 黄秋岚 黄秋伟 檀小辉 李慧敏 刘功德 单彬 毛立彦 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区亚热带作物研究所/农业农村部亚热带果品蔬菜质量安全控制重点实验室/广西亚热带特色水果质量安全控制重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设专项（nycytxgxcxtd-2021-05-03）；;广西重点研发计划项目（桂科AB19245035）； |
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| 摘 要： | 磷酸蔗糖磷酸酶（SPP）是植物蔗糖生物合成最后一步催化反应的关键酶，对调控植物生长发育不同时期的蔗糖合成过程有重要作用。为探索金柑（Fortunella crassifiolia Swingle）SPP基因及其编码蛋白的序列特征及其在果实发育过程的表达特性，本研究以四倍体品种脆蜜金柑（F. crassifiolia Swingle cv. Cuimi）为试验材料，采用反转录PCR和cDNA末端快速克隆（RACE）方法从金柑果肉中克隆SPP基因，对其进行生物信息学和原核表达分析，并检测果实发育不同时期该基因在果肉中的表达量。结果表明，FcSPP基因的cDNA序列全长1 638 bp，最长开放阅读框（ORF）为1 191 bp，编码396个氨基酸，理论等电点为6.57，为稳定的亲水性蛋白，二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。FcSPP蛋白含有S6PP和S6PP＿C保守结构域，属于植物磷酸蔗糖磷酸酶家族成员。系统进化分析结果显示，FcSPP蛋白与甜橙SPP同源性最高，在进化树上与拟南芥等双子叶植物SPP划归为一类。此外，本研究构建了FcSPP基因的原核表达载体，诱导表达获得纯化的FcSP...
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| 关 键 词： | 金柑 磷酸蔗糖磷酸酶 基因克隆 实时荧光定量PCR |
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