不结球白菜酵母杂交cDNA文库构建及BcFT上游调控因子筛选 |
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引用本文: | 徐新凤,王惠玉,米闵,侯喜林,李英,王建军,肖栋,刘同坤.不结球白菜酵母杂交cDNA文库构建及BcFT上游调控因子筛选[J].核农学报,2023(6):1130-1137. |
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作者姓名: | 徐新凤 王惠玉 米闵 侯喜林 李英 王建军 肖栋 刘同坤 |
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作者单位: | 作物遗传与种质创新国家重点实验室/农业农村部华东地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室,南京农业大学园艺学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金面上项目(32072575); |
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摘 要: | FLOWERING LOCUS T(FT)是调控植物开花途径中的关键基因,前期研究中,在比较晚开花wym-97和早开花cx-49两个品种的BcFT启动子时,发现cx-49的BcFT启动子存在一个1 577 bp的插入片段。为探索该插入片段对不结球白菜开花的影响,本研究构建不结球白菜酵母杂交cDNA文库,继而利用酵母单杂交技术筛选与BcFT启动子互作的蛋白。结果显示,本研究所得cDNA文库的库容为1.8×106 CFU,重组率为100%,插入片段长度分布范围约400~2 000 bp,平均长度大于1 000 bp,表明不结球白菜酵母杂交cDNA文库构建成功。自激活试验表明,800 ng·mL-1的金担子素(AbA)可以抑制诱饵载体的自激活。通过酵母单杂交试验筛选到结合BcFT启动子插入片段的上游蛋白BcSAP18和BcDEAR2。综上,本研究成功构建了不结球白菜酵母杂交cDNA文库并获得了BcFT启动子插入片段的互作蛋白,为进一步研究BcFT在不结球白菜开花中的调控机制奠定了基础。
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关 键 词: | 不结球白菜 BcFT基因 开花 cDNA文库 酵母单杂交 |
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