| 新西兰白兔γ-干扰素在昆虫细胞中的表达及其活性测定 |
| |
| 引用本文： | 王芳,胡波,任雪枫,范志宇,张则斌,徐为中,何孔旺.新西兰白兔γ-干扰素在昆虫细胞中的表达及其活性测定[J].华北农学报,2010,25(3). |
| |
| 作者姓名： | 王芳 胡波 任雪枫 范志宇 张则斌 徐为中 何孔旺 |
| |
| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院,兽医研究所,农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014
2. 江苏省动物疫病预防控制中心,江苏,南京,210036 |
| |
| 基金项目： | 农业部公益性行业科研专项，现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目 |
| |
| 摘 要： | 用RT-PCR方法对ConA刺激后的新西兰白兔外周血淋巴细胞(PBMC)扩增家兔γ-干扰素(IFN-γ)基因并进行测序,测序结果显示,与GenBank公布的序列核苷酸同源性达到99.4%～99.6%,氨基酸同源性为98.8%～99.4%;然后通过克隆、转化将家兔γ-干扰素基因转入转移载体pFastBacTM1,得到重组转移载体pFastBacTM1-IFN-γ,用pFastBacTM1-IFN-γ转化含有穿梭载体Bacmid的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,经筛选得到重组穿梭载体Bacmid-IFN-γ,用此质粒转染Sf9昆虫细胞,得到重组病毒rAcV-Bac-IFN-γ,经RT-PCR鉴定,结果显示重组IFN-γ在Sf9昆虫细胞中得到表达。用兔IFN-γELISA试剂盒测得重组兔IFN-γ的浓度为1 950 pg/mL。细胞病变抑制法结果显示,重组兔IFN-γ在MDCK上显示了较高的抗病毒活性,并测得重组兔IFN-γ的活性约为5.12×105 U/mg。
|
| 关 键 词： | 家兔 γ-干扰素 克隆 重组杆状病毒 |
Expression of IFN-γ of New Zealand Rabbit in Insect Cells and Its Antiviral Activity |
| |
| WANG Fang,HU Bo,REN Xue-feng,FAN Zhi-yu,ZHANG Ze-bin,XU Wei-zhong,HE Kong-wang.Expression of IFN-γ of New Zealand Rabbit in Insect Cells and Its Antiviral Activity[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2010,25(3). |
| |
| Authors: | WANG Fang HU Bo REN Xue-feng FAN Zhi-yu ZHANG Ze-bin XU Wei-zhong HE Kong-wang |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
