| 鸡ELAVL1基因克隆、原核表达及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 刘佳隆,张译文,张悦然,孙奇娟,陈建,何雷,贾艳艳,丁轲,余祖华.鸡ELAVL1基因克隆、原核表达及生物信息学分析[J].中国畜牧兽医,2023(5):1807-1817. |
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| 作者姓名： | 刘佳隆 张译文 张悦然 孙奇娟 陈建 何雷 贾艳艳 丁轲 余祖华 |
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| 作者单位： | 河南科技大学动物科技学院功能微生物与畜禽健康实验室洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31702207)； |
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| 摘 要： | 【目的】试验旨在对鸡胚胎致死性异常视觉蛋白1(embryonic lethal abnormal vision like 1,ELAVL1)基因的CDS区进行克隆、表达和生物信息学分析。【方法】以鸡胚成纤维细胞(chick embryo fibroblast, CEF)cDNA为模板，通过PCR方法扩增ELAVL1基因CDS区序列，构建pMD19-T-ELAVL1克隆质粒。以pMD19-T-ELAVL1为模板进一步构建pET-32a-ELAVL1原核重组表达质粒，使用IPTG对重组菌株进行诱导表达，利用SDS-PAGE和Western blotting检测重组蛋白表达情况。通过在线软件对ELAVL1蛋白进行生物信息学分析。【结果】鸡ELAVL1基因CDS区长981 bp,编码326个氨基酸，与鸭的亲缘关系最近，与斑马鱼亲缘关系最远。SDS-PAGE和Western blotting结果表明，诱导表达重组蛋白主要以可溶性形式表达，其分子质量大小约55 ku。生物信息学分析显示，ELAVL1蛋白分子质量为36.10 ku,分子式为C1587H2494
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| 关 键 词： | 鸡 ELAVL1基因 克隆 生物信息学分析 |
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