| 大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析 |
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| 引用本文： | 章志涛,李祥龙,孔令丽,罗雨昕,王冬英.大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析[J].中国畜牧兽医,2023(3):1107-1117. |
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| 作者姓名： | 章志涛 李祥龙 孔令丽 罗雨昕 王冬英 |
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| 作者单位： | 广西大学动物科学技术学院广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室广西高校动物疫病预防与控制重点实验室 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金(2019GXNSFAA245013)；;国家重点研发计划项目(2021YFD1100100、崇科FA2019006)； |
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| 摘 要： | 【目的】克隆大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(Ser/Thr protein phosphatases 2A,PP2A)基因并构建原核表达载体，获得原核表达蛋白，为探究PP2A基因功能及其在大片形吸虫的发育中的作用奠定基础。【方法】提取大片形吸虫成虫虫体组织总RNA,应用RT-PCR方法扩增PP2A基因的完整编码区序列，并以双酶切的方式连接pET-28a(+)载体；经酶切、测序鉴定后获得阳性质粒pET-28a-PP2A,将pET-28a-PP2A重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行IPTG诱导表达，并对重组蛋白的诱导条件进行优化；通过SDS-PAGE及Western blotting检测大片形吸虫PP2A基因的表达效果；应用实时荧光定量PCR检测PP2A基因在大片形吸虫虫卵、囊蚴、6周龄童虫和成虫阶段中的表达情况。【结果】克隆的大片形吸虫PP2A基因编码区序列长1 161 bp,编码386个氨基酸，分子式为C1980H3105N535O566S24,分子质...
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| 关 键 词： | 大片形吸虫 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(PP2A) 原核表达 |
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