| 猪源戊型肝炎病毒ORF2蛋白生物信息学分析及真核表达研究 |
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| 引用本文： | 卓娜,朱忠武,李静,胡世享,王建昌,林华,陈朝林,韩佃刚,艾军,陈培富.猪源戊型肝炎病毒ORF2蛋白生物信息学分析及真核表达研究[J].中国畜牧兽医,2023(5):1959-1970. |
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| 作者姓名： | 卓娜 朱忠武 李静 胡世享 王建昌 林华 陈朝林 韩佃刚 艾军 陈培富 |
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| 作者单位： | 1. 云南农业大学;2. 湖南长沙海关技术中心;3. 云南昆明海关技术中心;4. 河北石家庄海关技术中心;5. 四川成都海关技术中心 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划课题(2022YFC2601605)； |
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| 摘 要： | 【目的】分析猪源戊型肝炎病毒(Swine hepatitis E virus, sHEV)4型ORF2蛋白的结构和功能，筛选具有保护性抗原的基因片段并表达蛋白，为研究其作为潜在保护性抗原提供候选蛋白。【方法】对sHEV 4型ORF2蛋白进行生物信息学分析，选取具有潜在保护性抗原蛋白的基因片段ORF2(128/140),通过PCR扩增、酶切后克隆至昆虫细胞表达载体，转染sf9细胞，通过Western blotting鉴定分析表达蛋白p128/p140。【结果】生物信息学分析显示，sHEV 4型ORF2蛋白存在2个稳定蛋白：p128和p140,分别含有496和476个氨基酸，二者皆为稳定蛋白，无跨膜区，蛋白二级结构主要以无规则卷曲为主。p128蛋白有11个T细胞表位、21个B细胞表位；p140蛋白有14个T细胞表位、18个B细胞表位。成功构建ORF2(128)、ORF2(140)2个基因的昆虫细胞表达载体，转染sf9细胞后经Western blotting检测发现，表达蛋白可被His标签单抗、sHEV抗体阳性血清识别。【结论】试验发现2个sHEV具有潜在保护性抗原的p128和p140蛋白，...
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| 关 键 词： | 猪戊型肝炎病毒(sHEV) ORF2蛋白 生物信息学分析 昆虫细胞 表达 |
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