半定量RT-PCR法评定不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达差异 |
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引用本文: | 汪以真,林文学,许梓荣.半定量RT-PCR法评定不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达差异[J].农业生物技术学报,2004,12(1):52-55. |
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作者姓名: | 汪以真 林文学 许梓荣 |
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作者单位: | 浙江大学饲料科学研究所,动物分子营养学教育部重点实验室,杭州,310029 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(No.30040036)和浙江省人才培养专项基金(No.RC01053). |
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摘 要: | 根据已报道的猪抗菌肽pr-39基因和看家基因β-肌动蛋白(β-actin)基因序列,分别设计pr-39和β-actin的引物,探讨了PCR体系中适宜的MgCl2浓度、循环次数,以及2对引物间竞争情况。实验揭示,要保证半定量RT-PCR的可行性与可靠性,适宜的MgCl2浓度为2.5mmol/L,循环次数为29;由于2对引物之间的杂交配对,两对引物需分别进行扩增。根据以上信息构建一优化的半定量RT—PCR法,以β-actin为内标,研究不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达的差异。结果显示,不同生长阶段猪pr-39基因表达有差异,从出生到断奶前pr—39表达量呈增加趋势,断奶时表达量下降,断奶后随日龄增加pr-39表达量再逐渐增加。
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关 键 词: | 半定量RT-PCR 猪 抗菌肽 pr-39 基因表达 |
修稿时间: | 2003年1月28日 |
Antibacterial Peptide pr-39 Gene Expression in Different Growth Stages of Pig Evaluated by Semi-quantitative RT-PCR Method |
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