| 新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析 |
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| 引用本文： | 张桂芝,陈亚波,徐程,张朝政,方维焕.新城疫病毒F蛋白结构域基因原核表达与抗原表位分析[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2006,32(1):82-87. |
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| 作者姓名： | 张桂芝 陈亚波 徐程 张朝政 方维焕 |
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| 作者单位： | 浙江大学,动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江,杭州,310029 |
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| 摘 要： | 以含新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因的重组质粒为模板,设计特异引物进行重叠-延伸PCR扩增获得F基因的抗原结构域基因片段Fa、Fb和Fa-l-Fb,经SalⅠ和NotⅠ酶切后,定向插入原核表达载体pGEX-6P-1,获得重组质粒pGEX-Fa、pGEX-Fb和pGEX-Fa-l-Fb;用定点突变方法获得重组质粒pGEX-Fa-mut.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,转化菌经IPTG诱导、提取表达产物进行蛋白电泳和免疫印迹分析.结果表明:Fa-mut、Fb和Fa-l-Fb结构域基因均获得了融合表达,表达产物与NDV阳性血清具有免疫反应性;与pGEX-Fa-mut不同,pGEX-Fa重组质粒在大肠杆菌中未能表达,且转化菌在IPTG诱导过程中未见生长,提示未经突变的Fa片段可能为毒性蛋白.三维结构预测结果显示,目的蛋白片段中均保留F蛋白中原有相应的抗原表位.
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 融合蛋白 结构域 抗原表位 原核表达 |
| 文章编号： | 1008-9209（2006）01-0082-06 |
| 收稿时间： | 2004-11-29 |
| 修稿时间： | 2004-11-29 |
Prokaryotic expression of structural domains of the Newcastle disease virus fusion protein and analyses of their antigenic epitopes |
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| ZHANG Gui-zhi,CHEN Ya-bo,XU Cheng,ZHANG Chao-zheng,FANG Wei-huan.Prokaryotic expression of structural domains of the Newcastle disease virus fusion protein and analyses of their antigenic epitopes[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2006,32(1):82-87. |
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| Authors: | ZHANG Gui-zhi CHEN Ya-bo XU Cheng ZHANG Chao-zheng FANG Wei-huan |
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| Institution: | Institute of Veterinary Medicine, Zhejiang University and Zhejiang Provincial Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine, Hangzhou 310029, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Newcastle disease virus fusion protein structural domains antigentic epitopes prokaryotic expression |
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