| 疯牛病和羊痒病Western blotting检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王辉暖,赵德明,宁章勇,杨建民,吴常德,郝俊峰,白玉,王传武,孟丽平.疯牛病和羊痒病Western blotting检测方法的建立[J].中国兽医学报,2007,27(1):66-70. |
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| 作者姓名： | 王辉暖 赵德明 宁章勇 杨建民 吴常德 郝俊峰 白玉 王传武 孟丽平 |
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| 作者单位： | 中国农业大学,国家动物海绵状脑病实验室,北京,100094 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研项目;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 以朊蛋白单抗AH6和碱性磷酸酶标记的马抗鼠酶标二抗建立了疯牛病和羊痒病的Western blotting检测方法。对Western blotting各种反应条件进行摸索。并确定了最佳工作条件，结果表明：匀浆缓冲液为RIPA时的最佳反应条件包括浓缩胶电泳电压为恒压90V，分离胶电泳电压为恒压160V，转印的最佳电压和时间为恒压100V1．5h；封闭液为3％BSA时，封闭15min，封闭效果最好；AH6的最佳稀释度为1：4000。4℃下孵育过夜。马抗鼠二抗的最佳稀释度1：1000，室温下孵育30min。采用已确立的反应条件对样品进行检测并与Prionics-Check WESTERN进口试剂盒的检测结果比较，发现其敏感性为100％，特异性为99．4％．与进口试剂盒（100％，100％）无显著差异，这为国产试剂盒研制提供了条件。
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| 关 键 词： | 疯牛病 羊痒病 |
| 文章编号： | 1005-4545(2007)01-0066-04 |
| 修稿时间： | 2005年3月3日 |
Development of Western blotting for detecting BSE and scrapie |
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| WANG Hui-nuan,ZHAO De-ming,NING Zhang-yong,YANG Jian-min,WU Chang-de,HAO Jun-feng,BAI Yu,WANG Chuan-wu,MENG Li-ping.Development of Western blotting for detecting BSE and scrapie[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(1):66-70. |
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| Authors: | WANG Hui-nuan ZHAO De-ming NING Zhang-yong YANG Jian-min WU Chang-de HAO Jun-feng BAI Yu WANG Chuan-wu MENG Li-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Western blotting |
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