| 犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 王凤雪,闫喜军,柴秀丽,罗国良,张海玲,邵西群,吴威,程世鹏.犬瘟热病毒RT-nested PCR检测方法的建立与应用[J].中国兽医科技,2007,37(11):955-959. |
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| 作者姓名： | 王凤雪 闫喜军 柴秀丽 罗国良 张海玲 邵西群 吴威 程世鹏 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院特产研究所,吉林吉林132109 |
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| 基金项目： | 科研院所社会公益研究专项（2005DIB4J048） |
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| 摘 要： | 根据犬瘟热病毒（CDV）弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白（NP）基因序列设计了套式引物，建立了RT-nested PCR检测方法。特异性试验表明，该法可以特异扩增出CDV NP基因片段，但从RNA病毒狂犬病病毒（RV）、犬副流感病毒（CPIV）、犬冠状病毒（CCV），DNA病毒犬细小病毒（CPV）、犬腺病毒（CAV）及正常Vero细胞中均不能扩增出条带。敏感性试验表明，RT-PCR可以扩增10^-6稀释度的病毒RNA，而建立的RT-nested PCR可以扩增到10。稀释度的病毒RNA，后者的敏感性明显高于前者。用RT-nested PCR法检测了2006年我国东北地区临床表现犬瘟热症状的病例19例，检出率达90％，明显高于RT-PCR的检出率（45％）。部分病例扩增片段的测序结果表明，CDVNP基因出现个别碱基变异。研究结果表明，建立的犬瘟热病毒RT-nested PCR方法敏感、特异，适用于动物犬瘟热的快速诊断。
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| 关 键 词： | 犬瘟热病毒 反转录巢式PCR 反转录PCR NP基因 |
| 文章编号： | 1673-4696（2007）11-0955-05 |
| 收稿时间： | 2007-07-02 |
| 修稿时间： | 2007-10-18 |
Development of RT-nested PCR for detecting canine distemper virus |
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| WANG Feng-xue, YAN Xi-jun,CHAI Xiu-li, LUO Guo-liang, ZHANG Hai-ling, SHAO Xi-qun,WU Wei,CHENG Shi-peng.Development of RT-nested PCR for detecting canine distemper virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(11):955-959. |
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| Authors: | WANG Feng-xue YAN Xi-jun CHAI Xiu-li LUO Guo-liang ZHANG Hai-ling SHAO Xi-qun WU Wei CHENG Shi-peng |
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