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| 猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达 | |
| 引用本文： | 冉旭华,李树东,闻晓波,王密,杨焕民,倪宏波,侯喜林,朴范泽,邵磊,李晓娟,李冬野,周恩民.猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达[J].中国畜牧兽医,2010,37(6):171-173. |
| 作者姓名： | 冉旭华 李树东 闻晓波 王密 杨焕民 倪宏波 侯喜林 朴范泽 邵磊 李晓娟 李冬野 周恩民 |
| 作者单位： | （黑龙江八一农垦大学动物科技学院 预防兽医学省重点实验室， 大庆 163319） |
| 摘 要： | 用原核表达系统表达猪圆环病毒2型ORF3基因，分析ORF3蛋白的抗原性。根据GenBank上公布的猪圆环病毒2型(PCV-2)核苷酸序列进行分析，针对ORF3基因设计并合成1对特异性引物，PCR扩增该基因，并将此片段克隆入原核表达载体pET-32a(+)上，命名为pET32a-ORF3，转化大肠杆菌Rosetta-blue(DE3) pLacⅠ感受态细胞，1.0 mmol/L IPTG 37 ℃诱导表达。结果表明，PCR扩增得到315 bp的片段，重组蛋白大小约为29 ku，与预期大小相符。Western blotting分析结果表明，重组蛋白能与抗His-tag的单克隆抗体反应，不与PCV-2阳性血清发生反应。猪圆环病毒2型ORF3基因能在大肠杆菌中成功表达，但与阳性血清之间没有反应原性，为进一步研究PCV-2 ORF3蛋白的功能及特性奠定基础。 |
| 关 键 词： | 猪圆环病毒2 型 ORF3基因 原核表达 |
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