| 猪圆环病毒2型(PCV2)河南分离株进化分析及ORF2基因的表达 |
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| 引用本文： | 陈陆,杨霞,王江辉,常洪涛,董加才,刘矿,刘红英,王川庆.猪圆环病毒2型(PCV2)河南分离株进化分析及ORF2基因的表达[J].农业生物技术学报,2009,17(4). |
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| 作者姓名： | 陈陆 杨霞 王江辉 常洪涛 董加才 刘矿 刘红英 王川庆 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究与发展计划(863)项目，国家支撑计划 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus2,PCV2)的核苷酸序列设计2对引物,使用扩增全基因的引物对来源于河南省焦作、开封和滑县的3株PCV 2型JZ株、KF株和HX株的ORF2基因进行扩增,扩增片段克隆到pMD18 T上,获得重组质粒pMD18-T-ORF2,并对其进行测序,测序结果登录在GenBank上,登录号分别为EF028202、EF064149和EF467928.序列分析表明,PCV2河南分离株ORF2基因与其它PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为92.4%～99.6%,氨基酸序列同源性为90.6%～97.9%,进化分析表明,河南分离株处于同一分支,与欧洲株亲缘关系较近.应用另一对引物从重组质粒pMD18-T-ORF2中PCR扩增出587 bp不包含核定位信号序列的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,成功构建了重组质粒pET-32a-ORF2,经IPTG诱导表达了ORF2基因编码的结构蛋白,经SDS-PAGE和Western blotting检测,表达的重组蛋白分子量约为40 kD,可被PCV2阳性血清识别,说明PCV2 ORF2基因得到成功表达.
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型(PVC2) ORF2基因 序列分析 表达 |
Phylogenetic Analysis of Porcine circovirus 2 (PVC2) Isolated from Henan Province and Expression of the ORF2 Gene in Escherichia coli |
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