鉴别欧洲型和美洲型PRRSV荧光定量RT-PCR方法的建立 |
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引用本文: | 温青娜,周其伟,周玲玲.鉴别欧洲型和美洲型PRRSV荧光定量RT-PCR方法的建立[J].动物医学进展,2013(3):51-57. |
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作者姓名: | 温青娜 周其伟 周玲玲 |
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作者单位: | 河南科技学院高职学院;达安基因股份有限公司;广东中大南海海洋生物技术工程中心有限公司 |
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摘 要: | 为了建立鉴别欧洲型和美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量RT-PCR方法,根据欧洲型和美洲型PRRSV的M基因保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够鉴别欧洲型和美洲型PRRSV的双重双色荧光定量RT-PCR方法。该方法的重复试验表明其组内和组间的变异系数最高分别为1.30%和1.96%;灵敏性及特异性试验表明其检测下限为1×101copies/μL,而且与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性。该检测方法的建立为不同型别的PRRSV快速诊断提供了有效手段,能够应用于临床样品检测。
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关 键 词: | 欧洲型 美洲型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 TaqMan探针 荧光定量RT-PCR |
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