| 利用GFP-Trap技术筛选与TaTLP1相互作用的蛋白 |
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| 引用本文： | 王菲,杨毅清,武文月,崔钟池,王海燕,刘大群.利用GFP-Trap技术筛选与TaTLP1相互作用的蛋白[J].河北农业大学学报,2020,43(2):76-82. |
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| 作者姓名： | 王菲 杨毅清 武文月 崔钟池 王海燕 刘大群 |
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| 作者单位： | 河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定 071000,河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定 071000,河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定 071000,河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定 071000,河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定 071000,河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心,河北保定 071000;中国农业科学院研究生院,北京 100081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;河北省高等学校科学技术研究项目 |
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| 摘 要： | 小麦类甜蛋白基因TaTLP1,在植物抗病防御反应中起重要作用。为筛选与TaTLP1相互作用的蛋白,本研究拟通过Gateway定向克隆技术构建带有GFP标签的重组载体TaTLP1-pEarleyGate103,在烟草中完成异源表达。利用GFP-Trap技术获得与TaTLP1互作的蛋白,质谱分析明确其种类。通过Western blot检测TaTLP1表达情况,以GFP抗体检测,膜上曝光结果显示,在约44 kD处出现条带,证明TaTLP1蛋白在烟草中成功表达;质谱分析GFP-Trap获得的洗脱蛋白,表明获得的候选互作蛋白中定位于胞外的病程相关蛋白1(Pathogenesisrelated protein 1, PR1)、非特异性脂质转移蛋白(Non-specific lipid-transfer protein, nsLTPs)等可能与TaTLP1存在互作。该试验为探索TaTLP1参与小麦抗叶锈病基因Lr19的防御反应机制奠定了理论基础。
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| 关 键 词： | 小麦叶锈病 Gateway克隆 GFP-Trap 蛋白互作 |
Identification of interacting proteins of TaTLP1 using GFP-Trap |
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| WANG Fei,YANG Yiqing,WU Wenyue,CUI Zhongchi,WANG Haiyan,LIU Daqun.Identification of interacting proteins of TaTLP1 using GFP-Trap[J].Journal of Agricultural University of Hebei,2020,43(2):76-82. |
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| Authors: | WANG Fei YANG Yiqing WU Wenyue CUI Zhongchi WANG Haiyan LIU Daqun |
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