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| 脊尾白虾UCHL5的基因克隆及其在卵巢发育中的功能研究 | |
| 作者姓名： | 高威 戴琴 张攀 宋崇阳 朱杉杉 赖晓芳 高焕 阎斌伦 |
| 作者单位： | 江苏省海洋生物资源与生态环境重点实验室 江苏省海洋生物技术重点实验室 江苏海洋大学 江苏 连云港 222005;江苏省海洋生物资源与生态环境重点实验室 江苏省海洋生物技术重点实验室 江苏海洋大学 江苏 连云港 222005；江苏省海洋生物产业技术协同创新中心 江苏 连云港 222005；江苏省农业种质资源保护与利用平台 江苏 南京 210014 |
| 摘 要： | 为了解泛素羧基端水解酶5基因(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L5, UCHL5)在脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)卵巢发育中的作用，本研究采用RACE技术克隆了脊尾白虾UCHL5全长cDNA，并对其在脊尾白虾不同组织和不同卵巢发育时期的表达情况进行分析，在此基础上构建了pET32a-UCHL5原核表达载体，进行诱导表达研究。结果显示，UCHL5 cDNA全长为1440 bp，共编码329个氨基酸，预测其相对分子量为37.57 kDa，理论等电点为5.51。系统进化分析表明，脊尾白虾UCHL5氨基酸序列与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)同源性最高(83%)，与同为甲壳纲的凡纳滨对虾、拟穴青蟹(Scylla paramamosain)和三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)聚为一支。荧光定量PCR分析结果显示，UCHL5在鳃中的表达量最高，其次是卵巢，且在以上 2种组织中的表达量均显著高于其他组织；在卵巢不同发育时期，UCHL5的表达呈先上升后下降的趋势，在产后恢复期(Ⅴ期)急剧下降至最低水平。构建的UCHL5原核表达载体在大肠杆菌(Escherichia coli)中成功表达UCHL5融合蛋白。本研究结果表明，UCHL5可能与脊尾白虾卵巢发育有密切关系，为研究甲壳动物卵巢发育的分子调控机制提供了理论基础。 |
| 关 键 词： | 脊尾白虾 UCHL5 卵巢 实时荧光定量PCR 原核表达 |
| 收稿时间： | 2020/11/9 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/12/8 0:00:00 |
Molecular Cloning of the Ubiquitin Carboxyl-Terminal Hydrolase Isozyme L5 and Its Functional Analysis During Ovarian Development in Exopalaemon carinicauda |
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| Authors: | GAO Wei DAI Qin ZHANG Pan SONG Chongyang ZHU Shanshan LAI Xiaofang GAO Huan YAN Binlun |
| Institution: | Jiangsu Key Laboratory of Marine Bioresources and Environment, Jiangsu Key Laboratory of Marine Biotechnology, Jiangsu Ocean University, Lianyungang, Jiangsu 222005, China;Jiangsu Key Laboratory of Marine Bioresources and Environment, Jiangsu Key Laboratory of Marine Biotechnology, Jiangsu Ocean University, Lianyungang, Jiangsu 222005, China; Co-Innovation Center of Jiangsu Marine Bio-Industry Technology, Lianyungang, Jiangsu 222005, China; Jiangsu Provincial Infrastructure for Conservation and Utilization of Agricultural Germplasm, Nanjing, Jiangsu 210014, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Exopalaemon carinicauda UCHL5 gene Ovary Real-time quantitative PCR Prokaryotic expression |
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