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牛优势卵泡膜细胞黄体化相关基因的筛选
引用本文:孟金柱,伍春亚,潘春威,等.牛优势卵泡膜细胞黄体化相关基因的筛选[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2022,50(3):1-9.
作者姓名:孟金柱  伍春亚  潘春威  
作者单位:铜仁学院 贵州省梵净山地区生物多样性保护与利用重点实验室,湖南农业大学 动物医学院
基金项目:贵州省科技计划项目(黔科合基础[2020]1Y138);铜仁市科技计划项目(铜市科研[2020]80号);贵州省重点实验室项目(黔科合平台人才[2020]2003号);铜仁市科技局科技支撑计划项目(铜市科研[2020]128号);铜仁学院生态畜牧创新团队项目(CXTD[2020-19])
摘    要:【目的】探究牛卵巢小黄体细胞(SLCs)和膜细胞(TCs)中的差异表达基因,进而筛选与TCs黄体化密切相关的基因,为深入研究SLCs、TCs特异性及TCs向SLCs分化的机制提供参考。【方法】利用R软件limma包中的DESeq2,筛选GEO芯片数据库GSE83524数据集TCs和SLCs中的差异表达基因,再用goseq软件对筛选出的差异表达基因进行GO功能富集分析,用 kobas软件进行KEGG信号通路分析,使用String结合Cytoscape软件进行PPI网络互作分析。采集思南黄牛颗粒细胞(GCs)和TCs,以RPLP0作为内参基因,用荧光定量 PCR法对筛选出的与TCs增殖及黄体化相关的基因进行验证。【结果】共筛选获得237个差异表达基因,其中表达上调的基因115个,表达下调的基因122个。GO功能分析结果显示,参与生物学过程的有147个基因,占差异表达基因总数的53.6%,分别富集于30个组;参与细胞组分的有125个基因,占差异表达基因总数的21.4%,分别富集于12个组;参与分子功能的有98个基因,占差异表达基因总数的25.0%,分别富集于14个组。KEGG分析共发现17条通路,其中可能与卵泡内膜细胞黄体化相关的通路为FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1等4个基因参与的卵巢类固醇生成通路。经过PPI网络互作分析,筛选出了前10位的hub基因。荧光定量 PCR分析结果显示,FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1、BUB1BKIF20A在SLCs和TCs中的转录水平与GEO芯片数据结果一致,表现为FSHR、CYP19A1CYP17A1在TCs中的表达量极显著高于其在SLCs中的表达量(P<0.01),PLA2G4A、BUB1BKIF20A在TCs中的表达量亦显著高于其在SLCs中的表达量 (P<0.05)。【结论】差异表达基因FSHR、PLA2G4A、CYP19A1、CYP17A1、BUB1BKIF20A在牛优势卵泡TCs增殖分化形成黄体的过程中发挥关键作用。

关 键 词:  差异表达基因  膜细胞  小黄体细胞  黄体化
收稿时间:2021/4/6 0:00:00

Screening of genes related to luteinization in dominant follicular theca cells of cattle
MENG Jinzhu,WU Chuny,PAN Chunwei,et al.Screening of genes related to luteinization in dominant follicular theca cells of cattle[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2022,50(3):1-9.
Authors:MENG Jinzhu  WU Chuny  PAN Chunwei  
Abstract:
Keywords:cattle  differentially expressed genes  theca cells  small luteum cells  luteinization
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