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采用酵母双杂交系统筛选梨PbTMT4互作因子
引用本文:程寅胜,杨立,陈健秋,张绍铃,伍涛,张虎平.采用酵母双杂交系统筛选梨PbTMT4互作因子[J].湖北农业科学,2019,58(24).
作者姓名:程寅胜  杨立  陈健秋  张绍铃  伍涛  张虎平
作者单位:湖北省农业科学院果树茶叶研究所,武汉 430064;南京农业大学园艺学院,南京 210095
基金项目:中央高校基本科研业务费专项;湖北省自然科学基金
摘    要:为筛选梨糖转运相关蛋白PbTMT4互作因子,基于已经建立好的砀山酥梨果实发育时期的cDNA文库,利用Matchmaker~(TM) Gold酵母双杂交系统,以构建的重组质粒pDHB1-PbTMT4为诱饵质粒,采用PEG/LiAc法转化酵母菌株NMY51。利用表型筛选法检测PbTMT4的自激活作用和毒害作用,利用氨基酸缺陷型培养基筛选PbTMT4互作因子。结果表明,诱饵蛋白PbTMT4在酵母双杂交系统中无毒性和自激活作用。通过酵母双杂交筛选以及测序和序列比对分析,共获得13个与PbTMT4蛋白相互作用的宿主蛋白。

关 键 词:PbTMT4  酵母双杂交系统  cDNA文库  互作因子
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